В экспозиции раскрыты темы:

история транспорта Санкт-Петербурга, метрополитены мира, история создания Ленинградского — Петербургского метрополитена. Особое место в музее отведено архитектуре. Метрополитен является не только сложнейшим инженерным сооружением, но и произведением архитектуры и искусства. В музее представлен железнодорожный путь, воссоздан электропоезд, в котором посетители могут попасть в кабину машиниста и ощутить, что значит управлять электропоездом, оборудован кабинет дежурной по станции 60-х годов, детали эскалатора, автоматы по продаже жетонов, а также форма работников метрополитена. В экспозиции «Начало истории» находятся рассекреченные документы 1944 года о начале строительства метро. Современным элементом экспозиции являются видео- и кинофильмы об истории Ленинградского — Петербургского метро, а также анимационный фильм в доступной, шутливой форме рассказывающий о правилах поведения в метрополитене